午夜电影院理伦片8888-久久九九有精品国产23百花影院-久久综合久久美利坚合众国-中文乱码免费一区二区三区-亚洲精品第一国产综合精品

寶予德科學儀器

科技創造未來

服務熱線:4008-216-837

技術文章

ARTICLE

當前位置:首頁技術文章基因擴增PCR的擴增與克隆方法及一些使用的小建議

基因擴增PCR的擴增與克隆方法及一些使用的小建議

更新時間:2020-11-24點擊次數:2394

 基因擴增PCR主要有冰箱、超凈臺、加樣器、混勻器、天平等。加樣器、天平除了要外,還應有定期校準。試劑分裝應在超凈臺中進行,擴增反應混合液應使用分子生物學級的,試劑制備好后應有質檢:一是否有污染、二是檢測試劑的擴增效果。

 

  基因擴增PCR的擴增與克隆方法:

  ①引物的序列應位于基因組DNA的高度保守區,且與非擴增區無同源序列。這樣可以減少引物與基因組的非特異性結合,提高反應的特異性

 

  ②引物長度:15-40bp為宜。引物過短或過長均可使反應的特異性下降。

 

  ③引物的堿基盡可能隨機發布,避免出現數個嘌呤或嘧啶的連續排列,G+C堿基的含量在40%-75%之間。

 

  ④引物內部應避免形成二級結構,特別是引物的末端應避免有回文結構。

 

  ⑤二個引物不應有互補序列,特別是3’端應避免互補,以免形成“引物二聚體”,浪費引物。

 

  ⑥引物5’末端堿基無嚴格限制,在與模板DNA結合的引物長度足夠的條件下,其5’端堿基可不與模板DNA互補而呈游離狀態,因此可在引物5’端加上限制性內切酶位點、啟動子序列或其它序列等以便于PCR產物的分析克隆等,引物的5’端至多可加10個堿基而對PCR反應無影響。

  基因擴增PCR的使用建議:

  1、使用本制品時務必將Buffer反復混勻后再加,避免因組分不一導致結果差異;

 

  2、配置和分裝反應液時請一定使用新的(無污染的)噴頭以避免污染;

 

  3、如擴增條帶多,可適當添加酶和dNTPs;

 

  4、當多重PCR擴增產物的長度均在1kb以內時,使用3%~4%濃度的Agarosegel進行電泳分離效果。

 

返回列表
  • 服務熱線 13711185719
  • 電子郵箱

    huilian.gao@bio-dl.com

掃碼加微信

Copyright © 2025 上海寶予德科學儀器有限公司版權所有    備案號:滬ICP備16027857號-3

技術支持:化工儀器網    sitemap.xml

主站蜘蛛池模板: 久久精品卫校国产小美女| 秋霞无码久久一区二区| 无码精品国产一区二区免费| 伊人精品无码一区二区三区电影| 国产精品麻豆欧美日韩ww| 欧美艳星nikki激情办公室| 美女裸体十八禁免费网站| 真人无码作爱免费视频| 精品人妻系列无码人妻不卡| 日本极品少妇xxxx| 亚洲精品国产欧美一二区| 国产乱人伦av在线a| 婷婷五月亚洲综合图区| 久久午夜无码免费| 亚洲综合无码一区二区| 欧美三级中文字幕在线观看| 日韩精品一区二区av在线| 中文乱码免费一区二区三区| 国产成人片无码视频| 国产中文字幕乱人伦在线观看| 国产成人无码a区在线观看视频app| 波多野结衣久久一区二区| 亚洲va成无码人在线观看天堂| 特黄特级毛片免费视频| 久久亚洲精品无码aⅴ大香| 在线播放真实国产乱子伦| 天天做天天爱夭大综合网| 精品国产自在精品国产精华天| 国产一区丝袜高跟鞋| 久久视频在线视频| 免费无码又爽又刺激聊天app | 少妇乳大丰满在线播放| 国产精品 精品国内自产拍| 色天使亚洲综合一区二区| 特黄做受又大又粗又长大片| 欧美另类精品xxxx| 特黄 做受又硬又粗又大视频| 无码人妻精品中文字幕 | 中文字幕人妻三级中文无码视频| 亚洲综合av色婷婷五月蜜臀| 女人扒下裤让男人桶到爽|